本发明公开了携载miRNA的VB12结合型纳米复合物的合成方法及应用。合成方法包括将PLGA-PEG纳米复合物、维生素B12、EDC和DMAP混合溶解在无水溶剂A中，15～40℃下搅拌反应；反应完成后，透析、去除溶剂得到维生素B12结合型纳米复合物。本发明的合成方法，制备条件温和，所需原料廉价，操作方便，工艺简单，高效实用。制备得到的纳米复合物，从水溶性、稳定性及肿瘤靶向性三大方面优化了核酸药物，赋予其高效、低毒的抗肿瘤作用，在肿瘤治疗领域中有着广泛的应用前景。