本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及植物转基因筛选载体pCALSm1及其应用。本发明提供的植物遗传转化筛选载体利用包含水稻乙酰乳酸合成酶突变基因的表达盒作为筛选标记，在愈伤组织筛选阶段使用嘧啶水杨酸类、咪唑啉酮类等除草剂作为筛选剂，所获得的转基因植株具备对嘧啶水杨酸类、咪唑啉酮类等除草剂的高抗性。该载体可作为转基因筛选载体附加其他功能元件使用，在转基因过程中利用植物内源基因，不引入菌源等外源筛选标记基因，不仅丰富了植物转基因筛选方法，还可有效降低外源基因引起的转基因植物的潜在安全风险以及公众对转基因植物的担忧，有利于转基因植物的商业化应用，市场价值和社会效益均良好。