本发明涉及基因检测技术领域，特别是涉及一种基于CRISPR/Cas和核酸试纸的核酸检测方法和人乳头瘤病毒快速检测试剂盒。所示人乳头瘤病毒检测试剂盒包括crRNA、Cas12、RPA上下游引物、缓冲体系和单链DNA报告分子；所述报告分子序列为5’‑NNN…‑3’，长度为3‑30碱基，进行FAM，DIG，Biotin标记，同时对核酸分子进行防止DNA酶或是激活后cas12降解的修饰。本发明的基于CRISPR/Cas和核酸试纸的核酸检测方法和人乳头瘤病毒快速检测试剂盒具有以下优点：采用创新的报告分子设计和修饰，并结合相应试纸条，完全杜绝非特异性显色，对临床实际应用具有显著意义。