本发明涉及基因检测技术领域，特别是涉及一种CRISPR/Cas12一步核酸检测方法及新型冠状病毒检测试剂盒，其中所述新型冠状病毒检测试剂盒包括crRNA、Cas蛋白、引物、缓冲体系和单链DNA报告分子；所述引物为：在待检测靶标分子区域寻找5’-TTTN-3’序列，并在其近5’区域0-200bp内设计正向引物，在其近3’区域25-200bp内设计反向引物，所得引物进行化学修饰防止DNA酶或激活后Cas12蛋白降解。本发明有益效果在于：相比于市面上现有的基于PCR核酸检测技术，本申请的核酸检测方法和新型冠状病毒检测试剂盒，使扩增和检测可以同步进行，因而操作更为便捷。