本发明公开了一种免疫细胞无血清冻存液，其特征在于，包括基础培养基和细胞冻存保护剂，所述细胞冻存保护剂由以下原料组成：聚乙二醇、壬基酚聚氧乙烯醚‑10、皂荚多糖、羧甲基纤维素钠、聚甘油脂肪酸酯、竹叶黄酮。本发明采用聚乙二醇、壬基酚聚氧乙烯醚‑10复配替代DMSO，改变细胞膜的通透性同时对细胞膜起到保护作用，使细胞内的自由水排除细胞外，减少在冻存过程中细胞内形成冰晶对细胞造成损害。添加皂荚多糖、羧甲基纤维素钠、聚甘油脂肪酸酯作为渗透压稳定剂，使细胞外环境保持稳定的渗透压。添加有竹叶黄酮，有助于细胞复苏后快速恢复活性。本发明还提供了一种免疫细胞的冻存方法，过程简便，满足科研、医疗等领域对免于细胞的需求。