本发明公开了一种新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸恒温荧光检测试剂盒，包括特异性引物2019-nCoV-1ab-F和2019-nCoV-1ab-R，以及探针2019-nCoV-1ab-P，用THF残基，[FAM-dT]荧光团和[BHQ1-dT]淬灭团取代靶标扩增子序列内的碱基，并在探针3’端标记[C3-Spacer]作为阻断基团，试剂中的核酸外切酶可在THF位点裂解探针，从而分离荧光基团和淬灭基团并产生荧光信号。本发明提供的试剂盒可在20min内实现新型冠状病毒的检测，特异性为100％，检测敏感性为10copies/μl。因此，本发明的试剂盒具有操作简单、快速、灵敏的特点。