本发明提供了一种具有立体选择性的酮还原酶和使用这种酮还原酶的一种(R)‑3‑羟基丁酸乙酯的不对称合成方法，包括：作为反应底物乙酰乙酸乙酯在具有立体选择性的酮还原酶的催化下生成目标产物(R)‑3‑羟基丁酸乙酯。本发明巧妙利用具有立体选择性的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的酮还原酶，一步反应即成功合成了高浓度的(R)‑3‑羟基丁酸乙酯。并且该不对称合成方法的整体工艺简单，反应条件温和，绿色环保，容易实施，而且，该酮还原酶具有极高的手性选择性，能够以较高的转化率催化生成目标产物，且该目标产物的ee值足够高。总之，本发明所提供的(R)‑3‑羟基丁酸乙酯的不对称合成方法特别适合大规模工业化生产，应用前景广阔。