本发明涉及基于三维荧光光谱的水体中雌激素生物降解潜力评价方法。以雌激素五日生物降解率表征雌激素生物降解潜力，荧光峰中心发射波长小于380 nm的荧光组分表征易生物降解荧光有机物，构建水体中碳标准化雌激素五日生物降解率与易生物降解荧光有机物含量的线性相关方程；扫描待测水样的三维荧光光谱，结合平行因子分析计算易生物降解荧光有机物含量；根据线性相关方程评价待测水样中雌激素生物降解潜力。本发明能够实现对地表水体中雌激素生物降解行为的评估和预测，便于针对性地开展污染控制；样品用量少、操作简单、成本低廉，无需复杂的样品处理和检测；平均相对误差不超过10%。