本发明基于高效液相色谱串联质谱检测技术并结合超声萃取及固相萃取前处理方法，提供了一种同时检测污泥中多类抗生素的分析方法，属于痕量环境污染物的检测技术领域。本发明解决了现有检测方法中部分抗生素回收率偏低、检测成本高、检测所需样品量大、检出限较高等问题。本发明的抗生素回收率为75.3～130.1％、方法检出限为1～3μg/kg；在样品检测时，仅需0.1g干污泥样品；采用旋转蒸发的方式降低超声萃取液中有机溶剂的含量，在固相萃取前，将超声萃取液定容至200mL即可，极大地减少了固相萃取过程中萃取液的过柱时间；本发明仅使用HLB小柱用于固相萃取，在提升待测抗生素回收率的同时，减少了检测成本。