本发明提供了一种检测多氯联苯的酶联免疫试剂盒，它包括：包被有包被原的酶标板、多氯联苯标准品溶液、多氯联苯抗体、酶结合物浓缩液、酶结合物稀释液、底物显色液、终止液、洗涤液，所述包被原为多氯联苯偶联抗原，所述酶结合物为酶标记的多氯联苯抗体，所述多氯联苯抗体是由免疫原免疫动物得到的。本发明还公开了一种应用上述酶联免疫试剂盒检测多氯联苯的方法，它包括：首先进行样品前处理，然后用试剂盒进行检测，最后分析检测结果。本发明提供的酶联免疫试剂盒可用于检测饲料样本中多氯联苯的含量，其操作简便、费用低廉、灵敏度高、能够现场监控且适合大量样本的筛查。