本发明公开了一种槲皮素纳米脂质体的制备方法，包括以下步骤：S1：准备原料；S11：准确称取无水槲皮素0.01g溶于10mL甲醇溶液，磁力搅拌至完全溶解(室温，220rpm)，得到溶液A；S12：称取0.1g卵磷脂，0.02g胆固醇共溶于20mL三氯甲烷，磁力搅拌至完全溶解(室温，220rpm)，得到溶液B；S2：槲皮素纳米脂质体的制备；S21：将所述步骤S11中的溶液A缓慢倾倒入磁力搅拌的所述步骤S12的溶液B中，磁力搅拌至透明无颗粒状态；S22：将所述步骤S21中得到的溶液置于250mL旋蒸瓶中，本发明涉及烟草病毒技术领域。该槲皮素纳米脂质体的制备及抗TMV活性研究方法通过制备槲皮素纳米脂质体提高槲皮素植物细胞吸收率，增强其抗TMV活性。