本发明公开了一种五联杯和进样装置及使用五联杯的检测方法，其中五联杯包括连接套和多个杯槽，所述连接套上设有多个与所述杯槽对应的连接孔，多个所述杯槽分别与多个所述连接孔一一对应垂直连接，从而使多个所述杯槽相互独立；进样装置包括进样装置本体、五联杯、球头柱塞和驱动装置，所述球头柱塞连接在所述进样装置本体上，所述驱动装置带动和控制所述五联杯移动；所述球头柱塞对所述五联杯进行限位。将检测所需要的所有试剂集成在一个测试卡盒内，使用方便且能节约临床检验时间；结构简单，且操作可控，同时降低了成本，适用于广泛推广。