本发明涉及乳酸菌发酵领域，一方面公开了一种乳酸菌培养基及其使用方法，所述培养基含有大米粉、酵母粉、糖蜜、乙酸钠、硫酸镁、柠檬酸铵、磷酸氢二钾、硫酸锰和吐温80。本发明一方面公开了如上所述的乳酸菌培养基在乳酸菌发酵中的应用。本发明一方面公开了一种乳酸菌的培养方法，该方法包括：将乳酸菌的种子液接种到如上所述的乳酸菌培养基中进行培养。本发明所述的乳酸菌培养基能够显著提高菌体的生长速度和菌体活力，能够使菌体更为强壮；利用所述培养基对乳酸菌进行发酵，在发酵结束时的菌体密度更高，发酵时间明显缩短。通过上述技术方案，能够降低生产成本，从而提高经济效益。