本发明公开了一种检测新型冠状病毒N蛋白的适配体胶体金试纸及其制备方法，适配体胶体金试纸包括：依次相互搭接的样品垫、结合物垫、硝酸纤维素膜和吸水垫；结合物垫上包被有胶体金标记的适配体探针；从样品垫到吸收垫的方向上，硝酸纤维素膜上依次设置有检测线和质控线，检测线包被有新型冠状病毒N蛋白单抗；质控线包被有链霉亲和素蛋白多抗。本申请的检测新型冠状病毒N蛋白的适配体胶体金试纸选用适配体和抗体结合检测新型冠状病毒的N蛋白，亲和力更高，反应速度更快，便于操作，易于质控和保存。