本发明提供了一种喷雾式表面增强拉曼散射基底，包括柔性基底以及分布在所述柔性基底表面和内部的金属纳米粒子，所述柔性基底为打印纸、滤纸、餐巾纸或硝酸纤维素膜。所述喷雾式表面增强拉曼散射基底增强效果好、稳定性高、价格低廉，有利于大批量样品的快速分析以及在室外现场检测。本发明还提供了一种喷雾式表面增强拉曼散射基底的制备方法，包括以下步骤：提供金属纳米粒子悬浮液，将所述金属纳米粒子悬浮液装入到喷雾容器中，用所述喷雾容器在柔性基底上喷溅出形状，使所述金属纳米粒子分布在所述柔性基底表面和内部，干燥后得到所述喷雾式表面增强拉曼散射基底。该制备方法简单，无需价格昂贵的先进仪器设备进行制备，适合大规模生产。