本发明属于土壤检测技术领域，公开了一种利用发光蚯蚓进行重金属污染土壤生态毒性检测的方法，所述利用发光蚯蚓进行重金属污染土壤生态毒性检测的方法包括：使用土壤重金属检测装置进行土壤样本检测，得到待检测区域的土壤中所含重金属的种类；从水花生中获取赤子爱胜蚓，对赤子爱胜蚓进行净化处理，清除体内杂质；测定蚯蚓体初始荧光值；将蚯蚓放入土壤样本中培育；对赤子爱胜蚓进行收集，分泌粘液后进行荧光值检测，得到实际荧光值；计算得到重金属污染土壤生态毒性。本发明利用重金属对发光蚯蚓体内发光蛋白抑制的原理，对其在土壤中活动前与活动后产生的粘液的荧光值进行检测，并计算平均抑光率，用时更短且精准度更高。