本发明涉及药物制剂加工技术领域，具体公开了一种维生素口服液及其制备方法与应用。本发明的维生素口服液包括维生素B2、维生素D和维生素E，其制备方法包括：(1)将山梨醇的水溶液与维生素B2混合，获得混合液一；(2)将维生素E与表面活性剂混合，获得混合液二，将所述混合液二加入到所述混合液一中，获得混合液三；(3)在所述混合液三中加入增稠剂，获得混合液四；(4)在所述混合液四中加入维生素D的乙醇溶液。本发明获得的包含水溶性和脂溶性维生素的口服液具有良好的理化和微生物稳定性。