本发明公开了一种具有温度响应负离子释放抗菌功能聚酰胺及其纤维的制备方法，包括，制备具有负离子释放抗菌功能粉体；将制备得到的负离子释放抗菌功能粉体，通过液态研磨处理制备成纳米粉体后，分散到乙二醇介质中，添加钛酸酯类表面修饰剂，得负离子释放抗菌功能纳米粉体乙二醇共混物；将分散好的负离子释放抗菌功能纳米粉体乙二醇共混物浓缩，与己内酰胺共混，进行原位聚合制备聚酰胺切片；将聚酰胺切片干燥后，喂入纺丝机的喂料器进行熔融纺丝，得到负离子释放抗菌锦纶纤维。本发明采用全新的负离子释放抗菌机理制备新的负离子释放抗菌纤维，纤维可以做成白色浅色，具有永久性负离子释放抗菌功能。