本发明提供了一种抑制幽门螺杆菌的益生菌组合物及应用，属于食品和药品技术领域。本发明所述益生菌组合物包括4株益生菌：鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和唾液乳杆菌。所述益生菌组合物对幽门螺杆菌具有协同抑制作用，能显著抑制幽门螺杆菌的生长、降低毒力因子CagA、VacA和Ure的基因表达水平，能使幽门螺杆菌感染模型小鼠的幽门螺杆菌转阴，并可有效降低人体中的幽门螺杆菌数量或使人体中幽门螺杆菌转阴。所述益生菌组合物的四株菌间具有相互协同作用，其抑制幽门螺杆菌的效果显著优于各菌株的单独应用效果。