本发明涉及蛋白领域，具体涉及一种生物活性多肽YFGSGFAAPFFIVRHQLLKK及其制备方法和应用，生物活性多肽YFGSGFAAPFFIVRHQLLKK的氨基酸序列为Tyr‑Phe‑Gly‑Ser‑Gly‑Phe‑Ala‑Ala‑Pro‑Phe‑Phe‑Ile‑Val‑Arg‑His‑Gln‑Leu‑Leu‑Lys‑Lys。经过体外免疫功能调节实验，验证了多肽YFGSGFAAPFFIVRHQLLKK具有较好的免疫调节功能。本发明的生物活性肽YFGSGFAAPFFIVRHQLLKK能够促进巨噬细胞一氧化氮诱生量增加，提高机体抵御外界病原体感染的能力，降低机体发病率，显著促进小鼠淋巴细胞增殖，提高生命的质量，对开发具有免疫调节功能的食品、保健品和药物具有十分重要的意义。