本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗菌肽及其制备方法与应用。本发明提供的抗菌肽氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，分子量为1555Da，等电点为12.18，所述抗菌肽经全自动多肽合成仪合成，并经HPLC反相柱层析脱盐纯化所得。本发明提供的抗菌肽分子量小，抗菌谱广，抗菌活性高，主要作用用于抑菌，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、巴氏杆菌有显著的抑菌效果；可以作为饲料添加剂，应用于动物生产上，改善断奶仔猪的肠道健康；并通过提高断奶仔猪免疫球蛋白的浓度，提高断奶仔猪的免疫力，降低腹泻率，促进动物的健康生长。