本发明涉及一种鉴定K326烤后品种的特异序列、试剂盒及其使用方法，属于生物分子鉴定领域，包括特异序列以及根据特异序列设计合成的引物和探针，还包括灵敏智能控制流路的多通道超低微流控核酸检测芯片、预装干粉检测试剂和阳性质控品；使用时，将不同样品加入微流控核酸检测芯片的加样孔中，盖好加样孔盖，放入微流控芯片检测仪中检测；进行PCR扩增并进行结果判定。本发明与普通荧光PCR法等相比，具有以下优势：特异性强：本发明的引物和探针针对K326品种特异序列设计，特异性强；敏感性高；易于保存，本发明的在微流控芯片内预装干粉试剂，保存方便。