本发明公开了一种利用微生物作用地下原油产甲烷方法，涉及石油开采技术领域。其特征在于：包括以下步骤：1）将药剂按比例与水驱、化学驱过程中要注入油层的油田注入水混合配制成激活液；2）将配制混合好的激活液注入到目标体系中，注入后目标体系内本源微生物开始激活、生长繁殖；最终经过120天以上的时间，该体系内的微生物可将原油或烃类物质部分降解转化成含有大量甲烷的天然气；3）、在体系的采出端收集气体并测量天然气组份含量，或不收集直接储存在体系内或地下形成油气聚集。室内物理模拟产气实验表明，无论是在水驱后油藏还是在聚驱、强碱三元复合驱、弱碱三元复合驱后的不同油藏条件下，均可以实现微生物降解原油产甲烷气的效果。