本发明属于植物快速繁殖技术领域，具体涉及一种两面针组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：(1)外植体选取与消毒：(2)培养基的制备：制备改良MS培养基，然后在改良MS培养基的基础上分别制备不定芽诱导培养基、继代增殖培养基和无菌生根培养基；(3)不定芽诱导培养：将消毒外植体的芽接种于不定芽诱导培养基中进行诱导培养，得到两面针不定芽；(4)继代增殖；(5)无菌生根。本发明两面针组织培养快速繁殖方法，可以快速培养出两面针种苗，能保持母本的优良性状；能有效提高繁殖系数和成苗率，且培养周期短，并且能定向培育单一性别植株，便于标准化种植，种植效益大大提高。