本发明适用于生物技术领域，提供一种细胞膜上受体蛋白的筛查方法以及验证方法，所述方法包括：在分离载体上修饰至少一种配体；用修饰后的分离载体与待筛查受体的细胞共同培养，得到表面结合有细胞的分离载体；基于机械力作用将细胞从所述分离载体上洗脱分离，弃去细胞并收集分离载体；将收集的分离载体经酶解处理得到肽段，并对肽段进行检测鉴别膜受体蛋白。本发明提供的细胞膜上受体蛋白的筛查方法，利用配体和受体间的高结合力，使用机械洗脱的方法直接从细胞表面拽取受体蛋白，从而实现细胞膜上受体的筛查，此方法简洁、高效、重现性好，有效解决了现有受体筛查技术在破碎细胞提取膜蛋白过程中所存在的容易丢失信息、背景蛋白干扰严重等问题。