本发明涉及一种大规模匿名RFID系统中概率性克隆攻击的检测方法，其具体步骤为：在任意i轮概率性克隆攻击的检测中，阅读器以时隙段的方式与RFID系统中的标签进行通信，并以时隙段为单位分析在该时隙段中应答的真实标签是否被克隆；阅读器在对第i轮每个时隙段的分析中，若发现克隆标签存在，得出RFID系统中存在概率性克隆攻击的结论，结束检测；若阅读器在完成第i轮所有时隙段的分析后仍没有发现克隆标签，则阅读器更新随机数种子继续执行第i+1轮概率性克隆攻击的检测；若阅读器在执行完n轮后仍没有发现克隆标签，得出RFID系统中不存在概率性克隆攻击的结论，结束检测。本发明实现对概率性克隆攻击的检测，并保证RFID系统要求的检测可靠性。