本发明公开了一种杜仲叶及其提取物HPLC特征图谱建立方法及其指纹图谱，该方法包括：步骤1供试品溶液的制备；步骤2对照品溶液的制备；步骤3色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为乙腈，流动相B为0.1％磷酸溶液，进行梯度洗脱；检测波长206nm；柱温：10‑30℃；流速：1.0ml.min‑1；进样量：10μl；步骤4测定，得到紫灯片的指纹图谱。本发明还对该指纹图谱的建立方法进行了方法学验证。本发明测定的杜仲叶及其提取物特征图谱，精密度高，稳定性好，重复性好，能够有效地控制杜仲叶及其提取物的质量，确保杜仲叶、提取物及其相关产品质量的均一稳定、安全有效。