本发明涉及基因工程技术领域，提供了一种产磷脂酶D的基因工程菌。本发明还提供了上述产磷脂酶D的基因工程菌的构建方法，方法如下：优化磷脂酶D基因密码子、分析磷脂酶D基因糖基化位点、糖基化位点定点突变及全基因合成、获得初步工程菌、质粒抽提、毕赤酵母细胞转化、重组阳性转化子的鉴定。同时，本发明还提供了上述产磷脂酶D的基因工程菌在sdLDL‑C检测试剂盒开发中的应用。本发明的优点在于：本发明构建的产磷脂酶D的基因工程菌能够高效表达PLD蛋白，水解酶活达115.2U/mL，且实现了其对现有sdLDL‑C检测试剂盒中PLD的替代，大大降低相应试剂盒的生产成本。