本发明公开了一种以N‑氧化吡啶衍生物为识别基团的近红外荧光探针化合物及其制备和应用。所述制备方法具体为：首先将吡啶类杂环化合物氧化成N‑氧化吡啶‑2‑甲醛衍生物，将其作为识别基团。最后，在有机溶剂中将罗丹明B酰肼与N‑氧化吡啶衍生物反应，得到N‑氧化吡啶‑罗丹明B类近红外荧光探针；本发明的N‑氧化吡啶‑罗丹明B类近红外荧光探针能高灵敏、高选择性地检测二价钯离子，可以实现环境中二价钯离子的比色和荧光双模式检测，也可以用于细胞内二价钯离子的快速检测。此外，所应用的N‑氧化吡啶衍生物为一类起始原料易得、易制备的新识别基团，与其它常见染料结合后，在检测其它重金属离子方面有着广泛的应用前景。