本发明涉及靶向Claudin18.2的人源化单克隆抗体，及其制备方法和应用；本发明通过细胞融合和杂交瘤技术，获得的Claudin18.2人源化单克隆抗体能高特异性结合CHO‑Claudin18.2细胞，而几乎不结合CHO‑Claudin18.1细胞，本发明的Claudin18.2的人源化单克隆抗体制备方法步骤简单，获得的Claudin18.2人源化单克隆抗体对表达Claudin18.2阳性肿瘤细胞有良好的ADCC和CDC活性。本发明的Claudin18.2的人源化单克隆抗体特异性高且副作用小，在治疗和/或预防或诊断与Claudin18.2有关的疾病例如肿瘤的应用具有很好前景。