本发明公开了一种利用生物反应装置培养人参干细胞的方法，包括以下步骤：(1)采用一步法培养人参不定根；(2)取人参不定根的根尖部分，置于渗透剂溶液中处理；(3)将处理后的人参不定根根尖部分先放入干细胞诱导培养基中培养，然后转入干细胞扩繁固体培养基中培养；(4)收集步骤(3)中得到的人参干细胞，接种到含有干细胞扩繁液体培养基的生物反应装置中，避光培养，获得人参干细胞。本发明获得了所需时间更短、步骤更简单的从成熟人参获得不定根，进而得到人参干细胞的方法，采用适宜的生物反应装置进行扩大培养，干细胞的增长倍数高，干细胞中有效成分含量高。