本发明属于恶性肿瘤检测领域，涉及一种用于快速辅助鉴别原发性多发肺癌(MPLC)与肺内转移癌(IPM)的标记物组合物及其应用。具体地，本发明提供了一种由EGFR、KRAS、TP53和RBM10基因突变组成的生物标记物组合物及其试剂盒，其应用于待测对象的原发性多发肺癌与肺内转移癌的快速辅助鉴别。该标记物组合物及其试剂盒能够快速辅助鉴别原发性多发肺癌与肺内转移癌，极大地降低了临床检测成本，并提高了检测效率，为肿瘤鉴别提供可靠依据。