本发明为一种利用质谱多重反应监测技术检测5、7、55型腺病毒方法，其具体步骤包括：将腺病毒5型、7型、55型六邻体蛋白特异性肽段基因进行合成；进行标记肽段混合试剂的制备；确定诊断标志物的离子峰值；步骤进行试剂盒的配制；进行样本的检测。本发明为腺病毒型、7型、55型感染早期的预警和诊断提供了一个新的标记物，具有重要的临床价值。利用质谱结果，证实腺病毒感染前期患者血清样本中出现与预先设定的腺病毒5型、7型、55型六邻体蛋白标志性肽段中标及重标一致的质谱离子峰。SILAC标记的中标及重标腺病毒5型、7型、55型六邻体蛋白标准混合试剂可作为腺病毒型、7型、55型感染早期预警及诊断标志物结果准确。