一种耐受辣椒且同时利用葡萄糖和木糖发酵的酵母菌的验证方法，包括以下步骤：S1、筛选出甘蔗糖蜜中的乙醇高产酵母菌株，记为LSK3；S2、使LSK3菌株进行辣椒耐受的适应性进化，获得适应后菌株，记为LSK3pe；S3、构建辣椒素存在的环境，通过比较辣椒环境下LSK3与LSK3pe的生长状况、利用葡萄糖发酵的能力、利用淀粉发酵的能力以及检测非辣椒环境下LSK3pe的木糖发酵进行验证。有助于获得经辣椒适应性进化的乙醇高产酵母菌，有助于应用在含辣椒的餐厨垃圾的微生物发酵。对其进行包括耐受辣椒、葡萄糖发酵、木糖发酵验证，有助于获得经验证后的耐受辣椒且同时利用葡萄糖、木糖发酵的酵母菌，便于后续投入实际应用。