本发明公开了一种高效的美国鹧鸪性别快速鉴定方法，取美国鹧鸪样品，置于裂解液中裂解后，提取基因组DNA，PCR扩增，电泳，当扩增产物只出现一条514bp特异性扩增条带时判定为雄性；当扩增产物同时出现514bp和360bp两条特异性扩增条带时判定为雌性；若此条带未出现514bp条，则不能判定检测样品的性别。本发明步骤简单且能快速且有效地区分美国鹧鸪的性别，解决了目前的禽类性别鉴定方法存在对美国鹧鸪无法有效区分性别、步骤繁琐、时间长的问题。