本发明涉及防伪技术领域，具体涉及基于静电纺丝纳米纤维布的微纳米光学不可克隆防伪标识及其制备方法和应用。该防伪标识的结构包括：由下至上依次设置的基底层、光响应层和封装层，防伪标识的制备方法为：将含有荧光粉的静电纺丝纳米纤维随机分布在基底上，再用光学透明胶进行封装。防伪标识的应用，包括：利用光学显微镜对静电纺丝纳米纤维布的随机图案进行拍摄，采用人工智能深度学习并记忆，形成真品数据库；在商品流通环节，利用光学显微镜拍摄防伪标识结构，然后传输到人工智能数据库，并利用人工智能进行识别；根据人工智能数据库和真品数据库的相似度自动验证真伪。