本发明提供了一种用于确定采空区水力连通性的示踪试验方法，涉及采矿工程和水力测试技术领域。该方法包括：根据采空区煤层底板等高线选择注水点和出水点，并设置注水孔和出水孔的孔径、倾角和深度；配制示踪剂，并根据采空区静水压力、采空区水位高度、矸石储水系数和显著性系数等确定示踪剂的投放量；从注水孔注入示踪剂，示踪剂全部注入后，持续注入清水，打开出水孔持续排水保持注水流量大于出水流量；设定取样间隔时间，持续监测示踪剂和采空区水压变化；根据取样中的示踪剂浓度和采空区水压情况，判别采空区的水流连通性。该方法合理的确定了示踪剂的投放量，并对采空区的水力连通性进行了定量评价，为井下水库建设和污水处理提供了依据。