本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种防治桃蚜的质体转基因植物的制备方法及其在防治桃蚜中的应用。本发明确认桃蚜取食植物质体，筛选获得桃蚜RNAi致死基因MpDhc64C之后，构建表达dsMpDhc64C的烟草质体转化载体，转化获得质体转基因烟草。桃蚜取食转基因植物之后目的基因表达水平显著下调，存活率及后代数显著降低，幸存桃蚜体重显著下降，说明植物质体表达的dsRNA成功进入桃蚜体内并引发RNAi效应，进而导致昆虫靶标基因出现下调，引发多种针对桃蚜的不利征状，本发明显著提高了植物的桃蚜抗性，为桃蚜防治提供了新的技术方案。