本发明公开了一种微生物纤维素‑琼脂糖复合水凝胶基油水分离膜及其制备方法，属于油水分离材料领域；本发明通过较为简单的工艺，将微生物纤维素水凝胶中灌注琼脂糖复合后经挤压制得微生物纤维素‑琼脂糖复合水凝胶，之后采用激光切割均匀的切割出宽度为0.2‑1.5mm的狭缝；将至少两张割后的微生物纤维素‑琼脂糖复合水凝胶片状材料叠放，且狭缝交叉构成网络结构；该分离膜具有孔隙率高、水通量大、油水分离速度快、效果好、分离性能稳定、可降解等优点，其制备工艺简单、原料丰富易得、成本低廉且环境友好；本发明方法制备的油水分离膜，适用于处理来自石油开采、管道泄漏、化工行业中排出的含油废水及回收有机萃取剂等。