本发明涉及一种负载希夫碱金属配合物抗菌微球的制备方法，该方法包括以下步骤：⑴按质量百分比计称量各单体：丙烯酸酯类疏水性共聚单体20%~45%、丙烯酸酯类亲水性阳离子单体季铵盐10%~35%、乙烯基类生物相容性单体10%~30%、丙烯酸酯类偶联单体10~15%；⑵将各单体、希夫碱金属配合物在搅拌条件下，依次加入去离子水、引发剂，反应后得到混合液；⑶混合液于加热浴中聚合反应，冷却至室温后过滤，得到负载希夫碱金属配合物抗菌微球乳液；⑷负载希夫碱金属配合物抗菌微球乳液经离心分离、洗涤、干燥，即得粉末状负载希夫碱金属配合物抗菌微球。本发明工艺简单、快捷、易于工业化。