本发明公开了一种利用浓缩菌液发酵生产乳酸的工艺，所述工艺包括以下步骤：A、配制菌种增殖培养基，通过好氧或厌氧方式培养乳酸生产菌，当菌体浓度不再增加，浓缩收集菌液，并加入菌种活性保护剂；B、将浓缩后菌液与碳源、菌种活性增强剂相混合，通过流加中和剂和碳源进行发酵培养，生产乳酸。本发明将乳酸发酵的菌种增殖和产酸阶段分开，通过专门的菌种增殖培养基，快速获得大量乳酸生产菌，然后浓缩获得高浓度的乳酸生产菌，以高浓度的乳酸生产菌进行发酵生产，具有提高产酸速率，缩短发酵周期，节约能耗的优点。