本发明公开了一种三维肝脏类器官复苏液和三维肝脏类器官的复苏方法，涉及细胞复苏液技术领域。该三维肝脏类器官复苏液的组分包括：烟酰胺50‑200mmol/L、胰岛素1‑50μg/ml、肝细胞生长因子1‑50ng/ml、表皮生长因子1‑50ng/ml、地塞米松1‑100μmol/L、胎牛血清8‑12wt%、亚麻酸1‑50μg/ml和极性溶剂0.01‑0.1wt%以及余量的基础培养基。本申请提供的复苏液能够提供足够的营养供类器官内肝细胞维持活性和生长培养。其成分简单，组容易获取、价格相对低廉，并且基础培养基有多种选择，可以适用于各种肝脏类器官，应用范围广，本申请提供的复苏方法简单，可操作性强。