本发明提供一种意大利蜜蜂体色分化相关基因的检测及其应用，涉及生物技术领域。所述检测的相关基因为意大利蜜蜂蝶呤‑4‑α‑甲醇胺脱水酶的基因，且检测额的方法主要包括设计荧光定量引物Amel‑PCD‑QRT‑F和Amel‑PCD‑QRT‑R、总RNA的提取、cDNA合成、实时荧光PCR和基因表达的计算。本发明克服了现有技术的不足，通过对蝶呤‑4‑α‑甲醇胺脱水酶PCD的检测建立蜜蜂中BH4合成量的相关参考指标，通过研究意大利蜜蜂群中各分化种类的蜜蜂的PCD的基因表达的水平，为意大利蜜蜂BH4合成途径提供理论基础，也为研究蜜蜂体内的色素代谢网络提供一定的参考。