本发明涉及一种外科密封剂试剂盒及其在脑、脊柱外科手术中的应用，包括含有氨基化合物的酸性缓冲液的第一注射器；含有碱性缓冲液的第二注射器；含有两种不同结构和/或分子量的聚乙二醇衍生物的粉剂瓶；以及配套工具，其包含推板、注射器支架、两通连接器、雾化喷头等零部件。该密封剂是以两种不同分子量和/或结构的聚乙二醇衍生物与氨基化合物进行复合交联形成的水凝胶，同时氨基化合物溶解在酸性缓冲液中，进一步降低了密封剂的溶胀率和提高了成胶速度，具有‑20％＜溶胀率＜20％和成胶时间小于1s的特性，可用于脑、脊柱等手术部位的辅助密封。