本发明属于纳米材料和高分子生物医用材料技术领域，尤其涉及一种载银丝素蛋白纳米颗粒抗菌剂、制备方法及应用。本发明制备方法如下：配置一定质量分数浓度的丝素蛋白溶液，然后将硝酸银或者纳米银按照一定的比例添加到丝素蛋白溶液中，均匀混合之后置于液氮中冷冻，在完全冻结之后经退火处理，获得载银的丝素蛋白纳米颗粒。本发明提供的载银的丝素蛋白纳米颗粒抗菌剂抗菌效果明显，其制备方法原料组成简单、制备工艺简单，制备过程无需添加其它化学试剂，适合工业化生产。