本发明公开了一种檀香精油的制备方法。所述制备方法包括如下步骤：(1)将檀香粉碎成檀香粉，将檀香粉加入提取液中浸泡，然后搅拌提取，过滤后收集滤液，将滤渣在提取液中搅拌提取2～3次，合并滤液，蒸干提取液得到檀香膏体；(2)向檀香膏体中加入吸附剂，混匀后为干样品；(3)将干样品装入玻璃层析柱中，用溶剂洗脱，得到洗脱液，将洗脱液蒸干溶剂得到檀香精油；所述提取液为体积浓度为85‑95％乙醇水溶液。本发明通过联合乙醇水溶液在低温下提取檀香精油的工艺和玻璃层析柱分离技术进行分离富集檀香精油，既保证完整地提取檀香中的香气成分，最大限度地富集保存稳定性差、对热敏感的香气成分，而且能够提升檀香精油品质和产率，降低生产成本。