本发明公开了一种重组I型人源化胶原蛋白C1L4T及其制备方法和用途。本发明提供的重组I型人源化胶原蛋白C1L4T包含以SEQ ID No.3所示的序列，所述重组I型人源化胶原蛋白C1L4T任选地包含以SEQ ID No.2所示的序列，优选地，以SEQ ID No.2所示的序列和以SEQ ID No.3所示的序列直接相连。本发明所制备的重组I型人源化胶原蛋白C1L4T相比I型胶原蛋白本身分子量较小，同时具有更加良好的细胞黏附效果，此外其氨基酸序列中部分来源于天然胶原蛋白氨基酸序列，生物相容性较好，制备方法简单，在低成本下即可获得较高产量的胶原蛋白。