一种单葡萄糖醛酸24‑羟基‑甘草次酸的制备方法，涉及医药化工领域，本发明以24‑羟基‑甘草酸为原料，首先进行溶解萃取纯化和活性炭除杂纯化，再通过β‑葡萄糖醛酸糖苷酶对其进行处理后脱去一份子葡萄糖醛酸，然后进一步通过大孔吸附树脂进行分离、纯化，最后对纯化后的单葡萄糖醛酸24‑羟基‑甘草次酸进行干燥，得到成品，本发明通过对24‑羟基‑甘草酸进行酶制剂预处理再利用树脂纯化，工艺科学合理、绿色环保，操作简单易行，能够实现连续化生产，本发明具有成本低，生产效率高，纯度高，易于推广，具有较高附加值，可以用作食品添加剂和药物前体物质，为食品和制药工业提供原料。