本发明公开了一种牛血清外泌体用于干细胞培养的方法，包括以下步骤：在干细胞培养基内加入预设量的牛血清，再额外加入预设浓度的牛血清外泌体。本发明所提供的牛血清外泌体用于干细胞培养的方法，优化了干细胞培养条件，能够改善干细胞的生长状态。在不需要提高牛血清加入量的情况下，能够增加牛血清外泌体的含量，为干细胞生长提供更多的活性成分及营养物质。同时不会引入过多油脂、激素、抗生素等杂质因子，减少对干细胞的影响。另外，通过额外加入牛血清外泌体，能够减少因牛产地不同、牛血清分离工艺不同、牛血清批次不同等因素造成的牛血清差异，有利于干细胞的稳定培养。