本发明适用于质量检测技术领域，提供了一种巨豆三烯酮半抗原、人工抗原及其制备方法、抗体和应用，所述巨豆三烯酮半抗原的结构式如下所示：其中，所述n为2‑4中的任一整数。本发明利用巨豆三烯酮上现有的酮基基团进行还原，并通过引入连接臂的方式，使其具备与载体蛋白偶联的羧基基团。一方面能最大限度的保留巨豆三烯酮的化学结构和特征，另一方面引入的羧基基团可直接与载体蛋白偶联，二者均为后续制备强特异性和高灵敏度抗体奠定了基础；具体地，以此巨豆三烯酮半抗原为基础制备巨豆三烯酮人工抗原，由该巨豆三烯酮人工抗原得到的抗体具有较高的效价、特异性和亲和力，能应用于烟叶中巨豆三烯酮快速、特异性检测。